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Siglec-9对TNF-α诱导的关节软骨细胞TLR4/NF-κB通路及凋亡的影响

         
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目的探讨唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9(Siglec-9)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的关节软骨细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路及凋亡的影响。方法体外培养人关节软骨细胞,分为对照组、TNF-α组(20 ng/ml TNF-α)、低浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+2 ng/ml Siglec-9)、中浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+10 ng/ml Siglec-9)和高浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+50 ng/ml Siglec-9),MTT法检测软骨细胞活性,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡情况,酶联免疫(ELISA)法检测软骨细胞上清液中白介素(IL)-1β、IL-6和IL-8水平,蛋白印迹(WB)法检测软骨细胞中TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)、p-IκB-α蛋白表达情况。结果与对照组相比,TNF-α组软骨细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著升高(P<0.05);与TNF-α组相比,低、中、高浓度Siglec-9组软骨细胞存活率显著升高(P<0.05),凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著降低(P<0.05);随着Siglec-9处理浓度的升高,软骨细胞存活率显著升高,凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论Siglec-9对TNF-α诱导的关节软骨细胞TLR4/NF-κB通路激活及凋亡具有抑制作用。

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