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解脂耶氏酵母脂肪酶基因Lip2在毕赤酵母中高活力表达

         

摘要

从解脂耶氏酵母中克隆出脂肪酶基因Lip2,将其连接到表达载体pPIC9K,然后电击转化到毕赤酵母GS115菌株中,通过筛选,获得一株表达活性较高的工程菌株HL10.通过对发酵条件和发酵参数的优化,在摇瓶中用1.5%的甲醇诱导3天,表达的脂肪酶的活力达到1598.5 U/mL.%  The extracellular lipase gene from Yarrowia lipolytica(Lip2) was cloned,ligated into vector pPIC9K. The recombinant plasmid pPIC9K-Lip2 was linearized by restriction enzyme SalI,then integrated into the genome of the methylotrophic yeast Pichia pastoris GS115. A clone named HL10 with higher lipase was selected. When the medium and fermentation condition were optimized,the lipase activity reached 1598.5 U/mL in a shaken flask cultivation with an apparent molecular weight of 36.0 kDa using Saccharomyces cerevisiae secretion signal peptide (α-factor) under the control of the methanol inducible promoter of the alcohol oxidase 1 gene.

著录项

  • 来源
    《河南科学》 |2013年第5期|589-593|共5页
  • 作者单位

    河南省工业酶工程技术研究中心;

    郑州 450008;

    河南省科学院生物研究所有限责任公司;

    郑州 450008;

    河南省工业酶工程技术研究中心;

    郑州 450008;

    河南省科学院生物研究所有限责任公司;

    郑州 450008;

    河南省工业酶工程技术研究中心;

    郑州 450008;

    河南省科学院生物研究所有限责任公司;

    郑州 450008;

    河南省工业酶工程技术研究中心;

    郑州 450008;

    河南省科学院生物研究所有限责任公司;

    郑州 450008;

    河南省科学院生物研究所有限责任公司;

    郑州 450008;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 水解糖苷键的酶;
  • 关键词

    解脂耶氏酵母; 毕赤酵母; 脂肪酶; 表达;

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