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ADAM17小干扰RNA联合阿霉素抑制人前列腺癌小鼠移植瘤生长的实验研究

         
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目的 探讨小干扰RNA沉默ADAM17(siADAM17)基因表达联合化疗药阿霉素(ADM)对人前列腺癌PC3细胞株和小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用.方法 人前列腺癌PC3细胞分为5组,分别为:空白对照组、 阴性对照组(转染空载体PGC-CONT)、siADAM17组(转染PGC-siADAM17)、ADM组(转染空载体PGC-CONT,0.05 g/L ADM,处理48 h)、 联合应用组(转染PGC-siADAM17,0.05 g/L ADM,处理48 h).噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术(FCM)检测PC3细胞增殖和凋亡情况.利用上述5组PC3细胞悬液构建小鼠动物模型,分组及命名同PC3细胞,空白对照组注射PC3细胞;阴性对照组注射PC3/PGC-CONT细胞;siADAM17组注射PC3/PGC-siADAM17细胞;ADM组注射PC3/PGC-CONT细胞,同时给予ADM 1 mg/kg腹腔注射,1次/2 d;联合应用组注射PC3/PGC-siADAM17细胞,同时给予ADM 1 mg/kg腹腔注射,1次/2d.原位末端标记(TUNEL)法检测小鼠移植瘤中细胞凋亡情况;SABC免疫组化检测瘤细胞增殖指数.结果 MTT法显示siADAM17组、ADM组和联合应用组PC3细胞的生存率均明显低于阴性对照组,联合应用组明显低于siADAM17(P<0.0001)和ADM组(P<0.05).FCM分析显示siADAM17组、ADM组和联合应用组细胞凋亡率均明显高于阴性对照组,而且联合应用组的凋亡率明显高于siADAM17组和ADM组(P<0.05).siADAM17组、ADM组和联合应用组的肿瘤体积分别从第20 d、24 d和16 d开始明显小于阴性对照组(P<0.05);从第16 d起,联合应用组小鼠的肿瘤体积明显小于ADM组(P<0.05)和siADAM17组(P<0.001).siADAM17组、ADM组和联合应用组TOPOⅡa增殖指数较阴性对照组均明显下降(P<0.001).siADAM17组、ADM组和联合应用组移植瘤细胞的凋亡率较阴性对照组均明显增加(P<0.001),联合应用组移植瘤细胞的凋亡率明显高于siADAM17组和ADM组(P<0.05).结论 siADAM17或ADM单独应用均可抑制前列腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,二者联合应用疗效更佳.

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