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首页> 中文期刊> 《国际病理科学与临床杂志》 >MiR-101靶向调控CREB1抑制肺癌的发展

MiR-101靶向调控CREB1抑制肺癌的发展

         
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目的:观察miR-101在肺癌细胞或组织中的表达变化情况,分析miR-101通过靶向调控环磷腺苷反应元件结合蛋白1(cyclic adenosine monophosphate responsive element binding protein 1,CREB1)对肺癌发生发展的影响。方法:实时聚合酶链反应检测肺癌组织,癌旁正常组织,直径≤5 cm,>5 cm,转移,无转移肺癌组织中的miR-101表达量以及各株肺癌细胞中miR-101与mRNA的表达量。MicroRNA靶基因数据库与荧光素酶报告基因检验CREB1为miR-101的潜在靶基因。实时聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测miR-101 mimics对CREB1 mRNA及蛋白表达的影响。实时聚合酶链反应检测肿瘤组织与癌旁正常组织CREB1 mRNA的表达量;免疫组织化学检测肿瘤组织和癌旁正常组织中CREB1的表达量。CCK-8检测各转染组的光密度(optical density,OD)值;流式细胞术检测细胞比值。Tranwell迁移实验和细胞划痕实验检测细胞迁移能力。观察21 d裸鼠肿瘤体积及质量;检测miR-101在miR-101 mimics转染组裸鼠肿瘤组织中的表达量;增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)染色检测裸鼠肿瘤细胞增殖情况。结果:与癌旁正常组织相比,肺癌组织中miR-101的表达量显著降低;转移的肺癌组织中miR-101的表达量显著低于无转移肿瘤组织;直径≤5 cm的肿瘤中miR-101的表达量显著高于直径>5 cm的肿瘤;各株肺癌细胞的miR-101表达量均显著低于正常肺细胞,而CREB1 mRNA表达量相反。miR-101可通过结合CREB1的3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)抑制CREB1的表达。miR-101能够抑制CREB1的mRNA翻译及其蛋白表达。肺癌组织中CREB1 mRNA表达量显著升高。miR-101可抑制肺癌细胞A549的增殖,迁移并使其细胞周期在S期聚集,CREB1补回该抑制作用。miR-101 mimics转染组裸鼠肿瘤体积及质量均显著低于对照组;miR-101过表达能够抑制A549细胞的增殖,抑制肿瘤发展。结论:miR-101通过抑制CREB1表达抑制肺癌的发展,可能成为肺癌诊断及治疗的新靶标。

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