苏云金芽孢杆菌原生质体的制备及大质粒转化

韩光杰; 孙俊; 李传明; 刘琴; 徐健

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苏云金芽孢杆菌原生质体的制备及大质粒转化

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研究苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生的最佳条件，为进一步提高原生质体转化率打下基础。通过酶解法对苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种工业生产菌株（Bacillus thuringiensis ssp．kurstaki）2671原生质体的制备及再生条件进行了研究，考察了菌体生长状态、溶菌酶浓度、处理时间等影响因素，采用PEG法对大质粒进行原生质转化。结果表明，对数生长前期的菌体（培养3 h），以SMML作渗透压稳定剂，溶菌酶浓度7 mg／mL，40℃下酶解40 min，原生质体生成量可达5．7×107个／mL，再生率可达14．1％。在此条件下，采用PEG法可将大质粒pLTV1－ep成功转化宿主菌，转化率为0．3 CFU／μg。

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来源
《江苏农业科学》 |2014年第11期|37-3940|共4页
作者
韩光杰; 孙俊; 李传明; 刘琴; 徐健;
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作者单位

江苏里下河地区农业科学研究所;

江苏扬州225007;

江苏里下河地区农业科学研究所;

江苏扬州225007;

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江苏里下河地区农业科学研究所;

江苏扬州225007;

江苏里下河地区农业科学研究所;

江苏扬州225007;

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正文语种 chi
中图分类其他杀虫剂;
关键词
苏云金芽孢杆菌; 原生质体; 制备; 转化;

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