首页> 中文期刊> 《江苏农业科学》 >两步化学转化法构建猪圆环病毒2型ORF2基因重组腺病毒质粒

两步化学转化法构建猪圆环病毒2型ORF2基因重组腺病毒质粒

         

摘要

为了利用化学转化法快速构建携带猪圆环病毒2型ORF2基因的重组腺病毒质粒以便获得表达该基因的重组腺病毒,首先把骨架质粒pAdeasy-1通过化学法转化到氯化钙法制备的E.coli BJ5183感受态菌中,通过含氨苄青霉素的LB平板筛选出含骨架质粒的阳性菌BJ5183/p,再次用化学法把插入有猪圆环病毒2型ORF2基因的穿梭质粒rpShuttle-CMV-276经PmeⅠ酶切线性化后转化到BJ5183/p感受态细胞中进行同源重组,再在含卡那霉素的LB平板上培养,筛选出卡那霉素抗性菌进行质粒抽提纯化,酶切并电泳鉴定,获得重组阳性质粒rPAD-276.结果表明,运用2步化学转化法构建重组腺病毒质粒是一种简便、快捷且容易操作的方法.

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号