胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对牦牛卵丘细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响及其与细胞凋亡的关联性分析

潘阳阳; 崔燕; 樊江峰; 李谷月; 余四九

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为研究胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF-1)是否通过调控热休克蛋白70 (heat shock protein 70,HSP70)抑制牦牛(Bos grunniens)卵丘细胞凋亡,本研究在牦牛卵丘细胞体外培养时分别加入0、50、100和200 ng/mL IGF-1,运用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫荧光技术从基因和蛋白水平检测HSP70的表达;qRT-PCR分析IGF-1对凋亡相关基因B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(B-cell lymphoma/leukemia associated x protein,Bax)的调节作用,流式细胞技术统计不同处理组卵丘细胞凋亡率.结果显示,(1) IGF-1浓度为100 ng/mL时,卵丘细胞的HSP70 mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于IGF-1浓度为50和200 ng/mL组(P＜0.05),对照组HSP70 mRNA的相对表达量最低(P＜0.05),卵丘细胞的细胞质和细胞核均可表达HSP70蛋白;(2)加入IGF-1,Bax mRNA相对表达量显著下降(P＜0.05),1 00 ng/mL时最低,Bcl-2 mRNA相对表达量显著增加,100 ng/mL时最高;(3)卵丘细胞的凋亡率在100 ng/mL IGF-1最低,仅为(6.32±0.84)％,其他处理组凋亡率均显著增加(P＜0.05),对照组凋亡率最高,为(26.14±3.16)％.上述结果表明,IGF-1可调节卵丘细胞的HSP70、Bax和Bcl-2表达,降低细胞凋亡率,其最佳作用浓度为1 00 ng/mL.本研究为阐明IGF-1抑制细胞凋亡的分子机制提供了新的依据,为进一步揭示IGF-1在卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的作用机制提供理论依据,有助于牦牛胚胎体外发育技术改进.

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来源
《农业生物技术学报》|2015年第9期|1207-1216|共10页
作者
潘阳阳; 崔燕; 樊江峰; 李谷月; 余四九;
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作者单位

甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;

甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;

甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;

甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;

甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
胰岛素样生长因子(IGF-1); 牦牛; 卵丘细胞; 热休克蛋白70(HSP70); 细胞凋亡;
入库时间 2024-01-27 03:14:57

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