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云纹石斑鱼心脏细胞系的建立与鉴定

     

摘要

鱼类细胞系在鱼类病毒学及功能基因组学方面发挥着重要作用.云纹石斑鱼(Epinephelus moara)是一种具有重要养殖价值的海水鱼类,尚未见细胞系建立的报道.本研究以云纹石斑鱼的心脏组织为材料,建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(epinephelus moara heart cell line,EMH).细胞系所用的培养基是在L15基本培养基中添加了HEPES(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid),抗生素,胎牛血清(fetal bovine serum,FBS),β-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-ME)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的完全培养液.EMH细胞己传至20多代,由成纤维样细胞和上皮样细胞组成.本研究检测了温度及FBS浓度对EMH细胞生长的影响.EMH细胞在18~30℃能正常生长,其最适生长温度为30℃,在36℃时不能正常生长.FBS浓度在10%~20%细胞均能快速生长,最适FBS浓度为15%.染色体分析表明,具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62%.用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的质粒载体pEGFP-N3转入EMH细胞后,EGFP成功表达.EMH细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础.

著录项

  • 来源
    《农业生物技术学报》|2015年第10期|1394-1400|共7页
  • 作者单位

    中国海洋大学海洋生命学院,青岛266003;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

    海洋科学与技术国家实验室海洋渔科学与食物产出过程功能实验室,青岛266071;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

    大连海洋大学水产与生命学院,大连116023;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

    中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    云纹石斑鱼; 细胞系; 核型; 增强绿色荧光蛋白(EGFP);

  • 入库时间 2024-01-27 06:29:43

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