重组蛋白H-NS对胸膜肺炎放线杆菌生物被膜形成的影响

达来宝力格; 金卉; 刘璨颖; 陈焕春; 周锐

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重组蛋白H-NS对胸膜肺炎放线杆菌生物被膜形成的影响

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在筛选胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacills pleuropneumoniae,APP)转座突变体库时,发现hns基因缺失突变可显著增强APP血清l型生物被膜的形成,该基因编码一种DNA结合蛋白(组蛋白样类核结构蛋白,H-NS).为了进一步研究H-NS对APP生物被膜形成的影响,实验以APP血清l型4074株基因组DNA为模板,PCR扩增了408 bp的hns基因编码区,并克隆到原核表达载体pET-28c中获得重组质粒pET28c-hns,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导表达和组氨酸亲和层析柱纯化获得大小约19 kD的重组蛋白rH-NS.将不同浓度的rH-NS添加到hns突变株1-21及其亲本菌株4074的培养基中,用微孔板法测定生物被膜的形成.结果显示,在不添加rH-NS时,4074株不能形成可见的生物被膜,而1-21株形成明显的生物被膜;在添加0.1～0.3μmol/L rH-NS的情况下,1-21株生物被膜的形成昔随着rH-NS浓度的升高而降低.而4074株随着rH-NS浓度的升高而升高;rH-NS添加量超过0.4 μmol/L对两个菌株生物被膜形成未见明显影响.结果表明H-NS蛋白负调控APP生物被膜的形成,并呈现一定的剂量效应.

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来源
《农业生物技术学报》 |2009年第3期|381-385|共5页
作者
达来宝力格; 金卉; 刘璨颖; 陈焕春; 周锐;
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作者单位

华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;

华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;

华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;

华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;

华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070;

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正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
胸膜肺炎放线杆菌; 重组组蛋白样类核结构蛋白(H-NS); 生物被膜形成;

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