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猪脑中硫氧还蛋白还原酶的纯化与表征

         

摘要

[目的]用新的方法从猪脑中提取纯化硫氧还蛋白还原酶(TrxR)并对其进行表征.[方法]通过硫酸铵盐析、DEAE-SepharoseFast Flow弱阴离子交换凝胶色谱柱层析、Blue-Sepharose亲和色谱柱层析、Resource Q强阴离子交换色谱柱层析和Superdex 200 prepgrade凝胶过滤色谱柱层析等方法,从猪脑中分离并纯化TrxR.采用聚丙烯酰胺电泳法、等电聚焦法、DTNB还原法和胰岛素还原法对TrxR的性质进行表征.[结果]从猪脑中分离并纯化出TrxR,其纯度大于99%,是酶粗提液的6 000倍,最终产率为13.9%.猪脑TrxR的分子量为56.0 kD,等电点为5.0.以DTNB为底物测得其Km和kcat值分别为62.9 μmol/L和467 min-1,以硫氧还蛋白为底物测得其Km和kcat值分别为3.9μmol/L和2 813 min-1.[结论]用新的方法从猪脑中纯化得到较高纯度的TrxR,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《安徽农业科学》 |2013年第18期|7832-78357885|共5页
  • 作者单位

    暨南大学;

    基因工程药物国家工程研究中心;

    广东省生物工程药物重点实验室;

    生物医药研究开发基地;

    广东广州510632;

    广东药学院;

    广东省生物活性药物研究重点实验室;

    广东广州510006;

    广东药学院;

    广东省生物活性药物研究重点实验室;

    广东广州510006;

    暨南大学;

    基因工程药物国家工程研究中心;

    广东省生物工程药物重点实验室;

    生物医药研究开发基地;

    广东广州510632;

    暨南大学;

    基因工程药物国家工程研究中心;

    广东省生物工程药物重点实验室;

    生物医药研究开发基地;

    广东广州510632;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜微生物学(兽医病原微生物学);
  • 关键词

    硫氧还蛋白还原酶; 纯化;

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