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不同保存条件对中国蛤蜊总DNA提取及线粒体16S rRNA基因扩增的影响

         

摘要

[目的]初步探讨保存条件对中国蛤蜊总DNA提取及线粒体16S rRNA基因扩增的影响.[方法]设置3种温度和4个时间点的正交试验,对不同温度和不同时间保存的中国蛤蜊进行总DNA提取及检验,判断不同保存条件对线粒体16S rRNA基因PCR扩增的影响.[结果]中国蛤蜊在4、-20和-40 ℃条件下保存7 d,其DNA含量和PCR电泳条带检出率均无明显差异,说明7 d内中国蛤蜊线粒体基因的保存是完好的.20和28 d的保存结果表明,在4、-20和-40 ℃条件下保存中国蛤蜊组织样的总DNA仍可出现很亮的电泳条带,但PCR结果则显示,线粒体16S rRNA基因扩增效果不好.[结论]若要利用中国蛤蜊总DNA作为模板扩增线粒体16S rRNA基因,最好能在7 d内进行.若需保存较长时间,应将样品放置在-40 ℃或更低温度.

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