两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较

黄成斌; 潘玲; 余为一

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两种来源的IBDV抗原制备单克隆抗体的比较

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[目的]比较以原核表达蛋白与纯化病毒制备单克隆抗体的特性. [方法]RT-PCR扩增IBDV VP2基因,通过原核表达系统表达目的蛋白,并亲和纯化重组蛋白.尿囊液扩增IBDV,并通过超速离心纯化病毒.分别用纯化的重组VP2蛋白和IBDV免疫Balb/c小鼠,ELISA筛选杂交瘤细胞株.[结果]获得了2株分泌VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价均为1:2×104;4株分泌IBDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价分别为1:2×106,1:6×104,1:1×105,1:4×103.所有单克隆抗体均与其制备用免疫原反应,不与空载体或其他病毒抗原反应.经10～20次传代,仍保持稳定的效价.[结论]纯化的原核表达VP2蛋白和IBDV均能诱导小鼠产生免疫应答;用原核表达的VP2蛋白作为免疫原,可以获得特异的VP2抗体.

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来源
《安徽农业科学》 |2010年第28期|15679-1568015682|共3页
作者
黄成斌; 潘玲; 余为一;
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作者单位

安徽省人兽共患病重点实验室;

安徽农业大学;

安徽合肥;

230036;

安徽省人兽共患病重点实验室;

安徽农业大学;

安徽合肥;

230036;

安徽省人兽共患病重点实验室;

安徽农业大学;

安徽合肥;

230036;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 Q28;
关键词
传染性法氏囊病病毒; VP2蛋白; 原核表达; 纯化抗原; 单克隆抗体;

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