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鸡IgG单克隆抗体的制备与鉴定

         

摘要

[目的]制备鸡免疫球蛋白单克隆抗体,提高诊断鸡特异性抗体的水平.[方法]应用盐析法粗提和葡聚糖G200凝胶层析分离纯化鸡血清IgG,免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合和ELISA筛选.[结果]间接ELISA法检测C44、C45、C67和C68共4株鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞的腹水效价分别为1:640 000、1:320 000、1:640 000和1:80 000.Western blot分析显示,C44和C45株单克隆抗体识别鸡IgG轻链,而C67和C68株单克隆抗体识别鸡IgG重链,它们与鸭、猪等血清Ig均没有反应.小鼠Ig亚类分析表明,4株细胞分泌的抗体均为IgG1型.[结论]成功获得了4株稳定分泌鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞.

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