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质粒DNA 免疫小鼠制备IGF-Ⅱ抗体的研究

         

摘要

[目的]用基因免疫法制备人类胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的抗体,从而检验基因免疫法的可行性.[方法]通过RT-PCR法克隆到IGF-Ⅱ基因,将其连接到pcDNA3.1A 载体上,用含IGF-Ⅱ基因的质粒通过皮下、肌肉注射2种途径免疫小鼠,制备抗血清;用Western blot法检测抗体特异性和抗体效价,探索基因免疫法制备抗体的方法,并进一步观察免疫次数及途径对抗体产生的影响.[结果]基因免疫不同次数的小鼠体内均有抗体产生,且皮下、肌肉不同免疫途径的血清均显示阳性结果,其中皮下注射免疫抗体产生较早;抗体效价可达到1:500,而且特异性较强.[结论]通过基因免疫法制备IGF-Ⅱ抗体是可行的,而且效果较好.

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