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家兔肌酸激酶的分离纯化和测定

         

摘要

[目的]提取分离纯化部分可溶解的肌酸激酶,应用于检测各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时的血清肌酸激酶水平改变.[方法]先用液氮处理家兔内侧腓肠肌和心肌,经过初步分离纯化得到肌酸激酶的粗提液,然后利用DEAE-52阴离子交换层析进一步纯化酶液,收集其中的活性峰,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度. [结果]证明肌酸激酶是一个二聚体酶,带有两个相同的近似43 kDa的亚基,同时显示家兔心肌和骨骼肌的肌酸激酶与其他物种的肌酸激酶有很大的同族性.[结论]新鲜心肌肌酸激酶的活性与贮存时间较长的心肌肌酸激酶的活性有很大差异.肌酸激酶同工酶具有重要的生理功能和临床医学应用价值.

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