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孕马血清促性腺激素对狗卵母细胞体外核成熟的影响

         

摘要

[目的] 研究孕马血清促性腺激素(PMSG;eCG)对狗卵母细胞体外成熟效果的影响.[方法] 采用切割法收集卵巢表面卵丘卵母细胞复合体(COCs),并且随机分为4组,在添加不同浓度的PMSG的基础培养液(含有10%胎牛血清的DMEM)中,5% CO2 ,38.5 ℃培养箱内培养48 h.在含有0.1%透明质酸酶的D-PBS中用细小玻璃管剥离卵丘细胞从而获得裸卵,为了鉴别核成熟期,用4%甲醛溶液固定裸卵15 min,然后用10 μg/ml Hoechst33342染色、压片,荧光显微镜下观察核形态.[结果] 体外培养48 h后,添加PMSG处理组卵丘扩散明显,但发育到MⅠ-M Ⅱ的比率都没有显著差异(P﹤0.05).100 IU/ml PMSG处理组GVBD期率显著低于对照组.[结论]添加PMSG改善了卵丘扩散的效果,但是没有提高核成熟率,需进一步改进狗卵母细胞体外成熟率的培养体系.

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