卵母细胞

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞治疗卵巢功能不全有不错的效果,但仍存在归巢效率低、效果欠佳等问题。目的:探讨电针疗法联合骨髓间充质干细胞治疗化疗型卵巢功能不全的效果。方法:从32只SD大鼠中随机选择8只做正常组,其余随机分为卵巢功能不全组、干细胞组、联合组,每组8只,采用腹腔注射环磷酰胺溶液制备卵巢功能不全动物模型。造模结束后,正常组不做处理,卵巢功能不全组尾静脉注射1 mL生理盐水,干细胞组与联合组尾静脉注射1 mL骨髓间充质干细胞悬液(细胞数为2×106),联合组大鼠进行电针治疗,30 min/d,持续7 d,治疗结束后取心脏血与卵巢组织观察疗效。结果与结论:①与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠血清雌二醇激素水平明显升高,卵泡刺激素水平明显降低;②与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠卵巢卵母细胞数量明显增加;③与干细胞组相比,联合组的骨髓间充质干细胞归巢水平明显增加(P=0.0043),CXCR4蛋白表达水平升高(P=0.036);④与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠卵巢凋亡细胞明显减少,Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高;与干细胞组相比,联合组Bax表达水平明显降低(P=0.0284),Bcl-2表达水平明显升高(P=0.0364);⑤结果显示,电针能促进骨髓间充质干细胞归巢,并增强骨髓间充质干细胞的抗凋亡作用。

摘要： β-微管蛋白8(tubulin beta eight classⅧ,TUBB8)为灵长类动物中一种特有的β-微管蛋白,其编码基因TUBB8与女性不孕的相关性于2016年得到明确。TUBB8基因的百余种不同突变均可不同程度地影响生育过程,导致女性不孕的可能性增高。众多的基因突变可以按照其遗传模式特点和碱基变化特点的不同而进行分类及归纳。从基因水平出发的研究逐步揭示了基因突变所导致的蛋白质转录的错误及功能区作用的异常,再以分子水平异常解释细胞水平异常,进一步可以归纳出7种导致女性不孕的机制,涉及女性妊娠前及妊娠的全过程。目前,对于TUBB8的研究已逐渐应用于临床,在不孕症的诊断、治疗以及辅助生殖技术的改善等方面均有不同程度的进展。

摘要： 为了探究microRNAs(miRNAs)在斑马鱼生殖细胞发育过程中所起的作用,本研究在斑马鱼胚胎期过表达miR-430,结果发现原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)迁移出现紊乱,并且通过qRT-PCR发现nanos3、piwil2及tdrd7等生殖质基因的表达水平显著下调。此外,在斑马鱼性腺发育过程中,通过组织学观察发现过表达miR-430会导致雌性斑马鱼卵母细胞发育异常、卵巢发育迟缓,但是对雄性生殖细胞及性腺的发育没有造成明显的影响,并且进一步统计分析表明,miR-430不影响斑马鱼的性别分化。综上所述,本研究初步明确了过表达miR-430对斑马鱼PGCs迁移、性腺发育以及性别分化的影响,并为进一步探究miR-430在斑马鱼生殖细胞发育过程中的功能及分子机制奠定了理论基础。

摘要： 胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)不仅是各种代谢性疾病的重要病因之一,也是影响女性生殖功能的一项重要因素。近年IR对女性生殖功能的影响越来越受到国内外学者的重视,并从不同角度、不同层面对IR影响女性生殖功能的问题进行了一系列研究。IR通过扰乱卵母细胞线粒体功能,破坏氧化与抗氧化的平衡状态,产生炎症因子,使卵母细胞质量下降,线粒体功能损伤加重IR,卵母细胞质量进一步下降,如此形成恶行循环。IR通过影响子宫内膜的能量代谢、AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)通路分子的表达、慢性炎症状态以及其他微小分子的表达,使子宫内膜容受性下降,最终导致生育能力降低。此外,多种不良妊娠结局及妊娠并发症也与IR有关,如IR是自然流产的一个危险因素,妊娠前IR会增加妊娠期糖尿病的发生率,也会增加后代出现葡萄糖耐受不良、巨大儿、肥胖和高血压等的风险。

摘要： 外泌体是一种由多种细胞分泌的直径为40~100 nm的细胞外囊泡,参与细胞间的信息传递,在卵母细胞生长发育以及胚胎发育等方面起到非常重要的作用。本文介绍了外泌体组成、提取、鉴定和功能,并对外泌体在调控卵母细胞发育与胚胎发育中的作用进行阐述,以期为外泌体的进一步研究提供参考依据。

摘要： 在动物生产中,卵母细胞及早期胚胎的发育质量是影响动物繁殖性能的关键因素。哺乳动物卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中存在活跃的组蛋白修饰变化,其中对组蛋白甲基化和乙酰化研究最多,活跃的组蛋白修饰变化在细胞重编程过程中起到重要的调控作用。本文综述了哺乳动物卵母细胞及受精后早期胚胎的组蛋白甲基化和乙酰化动态修饰变化以及影响因素,为哺乳动物的发育研究提供理论依据。

摘要： 旨在研究RFRP-3对猪卵母细胞体外成熟的影响。本研究采用从屠宰场收集健康母猪的卵巢中挑取的GV期卵母细胞,随机分为3组,在培养基中分别添加0、10^(-6)和10^(-8)mol·L^(-1) RFRP-3培养猪卵母细胞44 h后统计各组卵母细胞的成熟率;在后续试验中将收集到的卵母细胞随机分为2组,在培养基中分别添加0和10^(-8) mol·L^(-1) RFRP-3培养猪卵母细胞44 h,观察猪卵母细胞的卵丘扩展情况并计算各组的卵丘扩展指数和各组卵母细胞的成熟率;利用qRT-PCR检测卵丘扩展因子(PTGS2、HAS2、PTX3)、卵母细胞分泌因子(GDF9、BMP15)和周期蛋白相关基因(CCNB1和CDK1)的表达变化;利用ELISA试剂盒检测MPF和cAMP的含量;采用放射免疫法检测孕酮和雌激素的浓度,每组卵母细胞量不少于100枚,每个试验重复3次。结果表明,与对照组相比,添加10^(-8)mol·L^(-1) RFRP-3培养猪卵母细胞可极显著降低卵母细胞的成熟率(P0.05),但卵丘扩展因子(PTGS2、HAS2、PTX3)的表达极显著下降(P0.05);添加RFRP-3可促进GDF9(P<0.01)和BMP15(P<0.05)的表达,抑制CCNB1(P<0.05)和CDK1(P<0.05)的表达;同时试验组培养基中孕酮、雌激素的浓度也极显著下降(P<0.01)。综上,RFRP-3通过调控猪卵母细胞成熟相关因子和卵丘扩展因子的表达以及类固醇激素的分泌,从而抑制卵母细胞的体外成熟。本研究为阐明RFRP-3对哺乳动物卵母细胞的调控作用奠定理论基础。

摘要： 猪体外受精是动物胚胎工程中的关键辅助生殖技术,利用屠宰场卵巢卵子资源,可实现优质胚胎规模化体外生产。结合胚胎移植和基因编辑技术,可生产出试管猪和基因编辑猪,科研和产业前景巨大。然而,与其他物种相比,猪体外受精技术方案还不完善,胚胎发育效率和质量仍旧低下,尤其是卵子多精子受精问题仍然没有得到解决。本文总结了卵母细胞成熟、精子处理、精子获能、体外受精方式、受精液等体外受精技术关键环节,为猪体外受精技术进一步完善和应用提供基础。

摘要： 细胞重编程可以诱导细胞的分化,生成所需的细胞类型。使用细胞的内在组分,如卵母细胞质和转录因子,可以使体细胞重编程为多潜能干细胞。小分子化学诱导是另一种方法,能够以简单和高度可控的方式操纵细胞命运。北京大学研究团队实现了使用化学小分子诱导人体细胞生成人多潜能干细胞的过程。

摘要： 目的研究紫外线吸收剂二苯酮-3(BP-3)在其生理浓度范围内对小鼠卵母细胞体外成熟及其质量的影响,为人类生殖健康的研究提供参考。方法以6~10周龄的ICR雌鼠为研究对象,采用不同浓度的BP-3处理小鼠GV期卵母细胞,观察卵母细胞的体外成熟率。通过检测卵子活性氧(ROS)含量、DNA损伤、早期凋亡和转录水平来探讨BP-3对卵母细胞成熟发育的影响。结果BP-3对卵母细胞成熟的抑制呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组相比,0.8μmol/L BP-3处理提高了卵子中ROS水平,促进了DNA损伤和早期凋亡(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,抗氧化基因Gpx1和凋亡相关基因Bcl2的转录水平下调,促凋亡相关基因Bax表达水平提高(P<0.05)。结论在生理浓度范围内的BP-3暴露会降低小鼠卵母细胞的体外成熟水平及其质量。

摘要： 本研究旨在研究有无卵丘细胞对卵母细胞成熟及其胚胎发育能力的影响.本实验分别设裸卵组、卵丘细胞与卵母细胞共培养组、卵丘-卵母细胞复合体(COCs),以检测卵丘细胞对猪成熟卵母细胞的存活率、极体率,孤雌激活后的卵裂率、囊胚率的影响.[结果]COCs组卵母细胞经体外培养42小时后其成熟率最高(95.76％),显著高于裸卵组(88.96％,p＜0.05),虽然也高于卵丘细胞与卵母细胞共培养组,但是差异不显著(92.63％,p＞0.05);COCs组第一极体排出率为71.77％,显著高于共培养组和裸卵组(分别为64.99％,60.48％,p＜0.05);COCs组在后期发育中其卵裂率与囊胚率分别为86.43％,35.55％,显著高于共培养组和裸卵组,而卵丘细胞与卵母细胞共培养组卵裂率及囊胚率(分别为78.76％,27.45％)显著高于裸卵组(47.46％,20.63％,p＜0.05).结果表明,卵丘细胞对卵母细胞成熟及发育均有显著影响,在卵母细胞成熟过程中,卵丘细胞的旁分泌机制及卵母细胞与卵丘细胞的缝隙连接都会对卵母细胞成熟效率产生影响,并且在卵母细胞后期发育中,缝隙连接会对后期发育能力具有明显影响.

摘要： 伴随年龄增长,卵母细胞衰老进程逐渐加速,但其过程相当复杂,涉及到基因、转录、蛋白以及代谢物等各个层面,机制尚未清晰.代谢组学作为一种整体性的研究策略,与中医学的"整体观"、"辨证观"、"动态观"等学术思想有较高的趋同性,故本文将从代谢组学角度探讨中医"七七"理论的科学内涵和深刻价值,为临床中医药改善高龄辅助生殖助孕结局提供新的思路,为解决高龄不孕夫妇的生育问题作出贡献.

摘要： 为了研究磁场对女性生殖的影响,选用小鼠做为研究对象,在小鼠卵母细胞成熟的过程中,观察外加磁场对超排卵、体外成熟卵母细胞成熟率的影响,并且诱导磁场处理的成熟的卵母细胞孤雌活化.结果:暴磁后,超排卵以及体外成熟卵的成熟率与对照组相比都有显著提高.磁场处理过的成熟卵母细胞活化能力与对照组相比差异物统计学意义.

摘要： 养猪生产中50％的母猪仅提供30～40头仔猪即被淘汰,主要原因在于卵母细胞发育受阻.卵母细胞在促性腺激素作用下恢复减数分裂是保证卵母细胞发育成熟、并维持早期胚胎及胎儿发育的关键生理过程.卵母细胞发育成熟需要大量ATp以提供能量,葡萄糖一直被认为是提供ATp的主要底物,但是卵母细胞中仍然存在大量脂质,是否参与促性腺激素调控卵母细胞成熟尚不清楚.最新研究表明,脂肪酸β-氧化是促性腺激素诱导下卵母细胞成熟的必需条件,同时,AMPK磷酸化是启动脂肪酸β-氧化提供ATp的关键因素.本文重点综述近年来AMPK启动的脂肪酸β-氧化在促性腺激素调控卵母细胞成熟中的作用及机制.

摘要： 卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎体外培养是牛胚胎体生产的三个主要技术环节,与胚胎的存活及发育能力密切相关,进而影响胚胎移植后效率.本文综述了牛卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎体外培养的研究进展,为有关研究和生产提供参考.

摘要： 随着国家"全面二孩"政策的实施,高龄妇女的生殖问题已成为热点.《素问·上古天真论》中"五七阳明脉衰",标志着女性生理生殖功能的衰退,现代研究表明"肾气-天癸-冲任-胞宫轴"与西医"下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴"异曲同工,所以基于以上研究,特在本文探讨高龄女性不孕中卵泡液代谢组与中医里阳明脉衰的关系.

摘要： 目的：基于卵泡液代谢组学分析"四七"、"五七"女性卵泡液,探讨卵母细胞衰老机制,辨识并确定与高龄不孕肾气虚证有密切关系的差异性化合物. 方法：回顾性分析55例既往行体外受精-胚胎移植(in virto fertilization and em-bryo transfer,IVF-ET)或卵母细胞单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的不孕患者,按照年龄将其分为两组:高龄组(35～42岁,27例,"五七")和年轻组(28～35岁,28例,"四七"),选用拮抗剂超促排卵方案,利用超高效液相色谱-高分辨质谱技术分析两组的卵泡液,最终通过碎片离子扫描得到的碎片信息对这些物质进行结构鉴定以确定差异性化合物. 结果：发现两组间差异性化合物大致分为激素类、卵磷脂类、溶血磷脂类、蛋白降解片段4类,其中上调物有7种:4,5-Dihydroorotic acid、Maleylacetoacetic acid、4-oxo-Retinoic acid、Rhazidigenine Nb-oxide、Deoxycorticosterone、3-hydroxynonanoyl carnitine、5,6-Dihydrouri-dine,下调物有6种:DG(14∶1(9Z)/22∶2(13Z,16Z)/0∶0)、LysoPC(14∶0)、LysoPC(16∶0)、LysoPC(18∶0)、TG(18∶1(11Z)/24∶0/20∶5(5Z,8Z,11Z,14Z,17Z))、Phytosphingosine,仅在高龄组卵泡液中发现的差异性化合物有2种:Nicotine glucuronide、Phosphaticlylcholine(16∶0/22∶0). 结论：高龄组和年轻组相比生殖功能下降比较明显,揭示了中医"七七"理论的内涵.

摘要： 抗苗勒管激素(AMH)是转化生长因子β超家族成员之一,在雌性动物卵巢颗粒细胞中表达,通过自分泌或旁分泌作用调控卵泡发育及卵母细胞的成熟,并作为有效的内分泌标记物用于预测牛超数排卵效率及体外胚胎产量.本文综述了AMH的表达模式、转导途径、生理功能,及其在不同雌性动物中的应用研究,旨在促进其在动物繁殖领域中的深入研究与应用.

摘要： 抗苗勒管激素(AMH)是转化生长因子β超家族成员之一,在雌性动物卵巢颗粒细胞中表达,通过自分泌或旁分泌作用调控卵泡发育及卵母细胞的成熟,并作为有效的内分泌标记物用于预测牛超数排卵效率及体外胚胎产量.本文综述了AMH的表达模式、转导途径、生理功能,及其在不同雌性动物中的应用研究,旨在促进其在动物繁殖领域中的深入研究与应用.

摘要： 本文旨在对FST及其重要功能进行介绍，为日后FST的进一步研究和开发提供基础。自20世纪80年代人们从猪和牛的卵泡液发现卵泡抑素(Follistatin,FST)以来，关于FST的研究从未停止，并通过多种的体内体外实验发现了FST的多种功能作用。FST作为一种分泌型蛋白存在于哺乳动物体内的各种组织器官内，并由多种组织器官分泌，在激素调节，能量代谢，肌肉脂肪组织增殖分化方面具有重大作用。由于FST是从性腺中发现的，人们对于FST调节性激素分泌与信号传递，促进卵母细胞成熟和胚胎发育研究的较为透彻，进行过多个物种的动物实验，查明作用机制。FST作为TGF-β超家族的抑制剂，可以特异性与其一员抑肌素（Myostatin，MST)相结合并产生拮抗作用，促进机体肌肉增殖、分化和膨大。棕色脂肪作为哺乳动物体内重要的代谢组织一直是人们研究的热点，近年来发现FST可以促进棕色脂肪分化，诱导白色脂肪棕色化，并在细胞实验与小鼠实验中得到验证。

摘要： 本发明提供了一种卵母细胞培养液，该培养液中含有成熟的卵泡液。成熟的卵泡液相对于未成熟的卵泡液，成熟的卵泡液对卵母细胞体外成熟有积极作用的物质丰度更高，离成熟期越近的卵泡，它的卵泡液越能促进卵母细胞IVM，并改善其质量。使用体内成熟卵泡液作为卵母细胞体外成熟培养液的组分能有效提高卵母细胞的质量，并且能降低卵母细胞中的ROS含量。由此。不仅可以用来改善各种物种(如：牛、羊等)的卵母细胞体外成熟，提高制备优质的体外受精胚胎及克隆胚胎的生产率，还可供人类辅助生殖中卵母细胞体外培养成熟的运用提供参考，以改进现有的卵母细胞体外成熟的培养体系，从而促进生物医学的发展。

摘要： 本发明提供了一种体外保存/培养卵母细胞以抑制卵母细胞生发泡破裂的方法。本发明提供的方法采用卵泡液作为卵母细胞体外保存/培养的保存液或培养液，在20至30°C之间在体外保存/培养卵母细胞，以抑制卵母细胞生发泡破裂。这种方法可以大大的提高卵巢卵母细胞在科研和畜牧业生产上的利用率，为科研上利用屠宰场卵巢解除了时间上的限制，便于体外操作时间的安排；生发泡期卵母细胞常温保存/培养有助于提高卵母细胞体外成熟质量，促进核成熟和胞质成熟同步，是一种最佳的不依赖于抑制剂的生理学控制核成熟进程的方法。猪卵泡液易于制取，能够制成商品化制剂。这种方法对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种体外保存/培养卵母细胞以维持卵母细胞减数分裂停滞的方法。本发明提供的方法采用全血清作为卵母细胞体外保存/培养的保存液或培养液，在20至30°C之间在体外保存/培养卵母细胞，使其维持卵母细胞减数分裂停滞。这种方法可以大大的提高卵巢卵母细胞在科研和畜牧业生产上的利用率，为科研上利用屠宰场卵巢解除了时间上的限制，便于体外操作时间的安排；生发泡期卵母细胞的常温保存/培养有助于提高卵母细胞体外成熟质量，促进核成熟和胞质成熟同步，是一种最佳的不依赖于抑制剂的生理学控制核成熟进程的方法，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。

摘要： 本发明涉及用于从未成熟卵母细胞生成成熟卵母细胞并提高卵母细胞质量以提高辅助生殖技术(ART)成功率的方法和装置。所述方法包括：使用隧道纳米管形成细胞和卵母细胞，其中，所述隧道纳米管形成细胞将自体基因组材料、生物分子和细胞组分转移至所述卵母细胞。本发明的装置包括微流体装置，以提高在隧道纳米管形成细胞和卵母细胞之间转移生物分子和细胞组分的效率。

摘要： 未成熟卵母细胞的诱导方法包括：将由FIGLA、NOBOX、LHX8和TBPL2组成的4种基因、或者它们的转录物或表达蛋白导入到选自由多能干细胞、外胚层样细胞和原始生殖细胞组成的组中的至少1种细胞中。成熟卵母细胞的制作方法包括：将由FIGLA、NOBOX、LHX8和TBPL2组成的4种基因、或者它们的转录物或表达蛋白导入到选自由多能干细胞、外胚层样细胞和原始生殖细胞组成的组中的至少1种细胞中；以及对导入后的所述细胞和卵巢体细胞进行共培养。

摘要： 本发明属于生殖生物学领域，具体涉及一种促进未成熟卵母细胞体外成熟的NO微泡制剂及促进卵母细胞体外成熟的方法，其由壳膜层与内层空腔组成，所述内层空腔填充有包含NO的气体；所述壳膜层包括脂质材料、起泡剂、冻干支撑剂，所述脂质材料、起泡剂、冻干支撑混合后加入溶剂进行冷冻干燥后制成冻干粉末，得到壳膜层；所述的脂质材料成分选自天然磷脂、氢化磷脂、合成磷脂及其聚乙二醇修饰衍生物中的一种或多种；所述起泡剂为吐温‑80；所述冻干支撑剂为Poloxamer 188。本发明提供的NO微泡制剂添加进常规卵母细胞体外培养液中可实现NO长效释放，并且生物安全性高，促进了GV期卵母细胞的体外成熟率，具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种卵母细胞冷冻保存液及磁场低温保存卵母细胞的方法。本发明通过在卵母细胞冷冻保存液中添加海藻糖修饰的超顺磁性纳米颗粒，并在磁场下低温保存鼠卵母细胞，实现了对卵母细胞的冷冻保存方法的优化，在冷冻保存小鼠卵母细胞、胚胎时，不仅克服了现有技术的诸多缺陷，而且保存效率显著提高。

摘要： 本发明提供了一种卵母细胞培养液，该培养液中含有成熟的卵泡液。成熟的卵泡液相对于未成熟的卵泡液，成熟的卵泡液对卵母细胞体外成熟有积极作用的物质丰度更高，离成熟期越近的卵泡，它的卵泡液越能促进卵母细胞IVM，并改善其质量。使用体内成熟卵泡液作为卵母细胞体外成熟培养液的组分能有效提高卵母细胞的质量，并且能降低卵母细胞中的ROS含量。由此。不仅可以用来改善各种物种(如：牛、羊等)的卵母细胞体外成熟，提高制备优质的体外受精胚胎及克隆胚胎的生产率，还可供人类辅助生殖中卵母细胞体外培养成熟的运用提供参考，以改进现有的卵母细胞体外成熟的培养体系，从而促进生物医学的发展。

摘要： 本发明公开了一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液及卵母细胞培养方法，属于细胞培养技术领域。本发明公开的一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液，包括无Hepes的M199基础培养液、无脂肪酸BSA、HMG、17β‑雌二醇、EGF、L‑cysteine、bFGF、100xGlutamax、叶酸、胆酸、CXCL12。本发明公开的牛卵母细胞体外成熟培养液在不使用血清的情况下培养牛卵母细胞，提高了牛卵母细胞的成熟率，并有效提高体外受精胚胎和体细胞核移植胚胎的早期胚胎发育率。

摘要： 本发明提供了一种体外保存/培养卵母细胞以维持卵母细胞减数分裂停滞的方法。本发明提供的方法采用全血清作为卵母细胞体外保存/培养的保存液或培养液，在20至30°C之间在体外保存/培养卵母细胞，使其维持卵母细胞减数分裂停滞。这种方法可以大大的提高卵巢卵母细胞在科研和畜牧业生产上的利用率，为科研上利用屠宰场卵巢解除了时间上的限制，便于体外操作时间的安排；生发泡期卵母细胞的常温保存/培养有助于提高卵母细胞体外成熟质量，促进核成熟和胞质成熟同步，是一种最佳的不依赖于抑制剂的生理学控制核成熟进程的方法，对于动物胚胎工程以及人类辅助生殖技术研究和应用都有重要意义。