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革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

         

摘要

[目的]构建革胡子鲶生长激素基因原核表达体系.[方法]采用PCR方法,扩增得到了革胡子鲶生长激素基因成熟肽的cDNA序列,将该序列克隆至原核表达载体pRSET-A,构建重组质粒pRSET-mGH,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达.[结果]革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA序列全长534 bp,编码1个由178个氨基酸残基组成的生长激素成熟肽,分子量为20.28 kDa,等电点为5.93.SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的目的融合蛋白分子量为27.41 kDa,主要以非可溶性的包涵体形式存在于菌体沉淀中.目的融合蛋白的表达量高达细菌沉淀蛋白总量的36.8%.[结论]该研究为革胡子鲶生长激素的产业化开发和应用奠定了基础.

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