人血管抑素K1-3在毕赤酵母胞内表达的研究

张利芳; 胡娴娴; 于洪涛; 吕军; 王惠琴

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人血管抑素K1-3在毕赤酵母胞内表达的研究

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目的:构建人血管抑素K1-3的重组酵母胞内表达质粒PHIL-D2/K1-3,获得重组目的蛋白.方法:从胎儿肝脏组织用RT-PCR方法扩增人血管抑素K1-3目的基因,克隆至酵母胞内表达质粒PHIL-D2中,线性化后转化到毕赤酵母GS115胞内,经PCR和Sourthern杂交筛选出阳性转化子,并用甲醇诱导表达.表达产物进行SDS-PAGE(12%)和Western blot检测,经赖氨酸亲和层析柱纯化后,用Lowry法测定蛋白含量,并进行生物活性测定.结果:SDS-PAGE和Western blot结果显示,表达蛋白质的相对分子量为30kd左右,低糖基化.Lowry法测定蛋白表达量为6.8mg/L.活性测定实验表明重组血管抑素能特异抑制人血管内皮细胞的增殖.结论:在毕赤酵母GS115胞内成功表达了人血管抑素K1-3重组蛋白.

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来源
《包头医学院学报》 |2006年第4期|368-370|共3页
作者
张利芳; 胡娴娴; 于洪涛; 吕军; 王惠琴;
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作者单位

包头医学院,内蒙古,包头,014010;

长春生物制品研究所;

长春生物制品研究所;

包头医学院,内蒙古,包头,014010;

包头白云区防疫站;

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正文语种 chi
中图分类细胞工程;
关键词
人血管抑素K1-3; PHIL-D2; 毕赤酵母GS115; 表达;

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