RNAi技术沉默VEGF-C基因对小鼠4T1细胞生物学行为的影响

于媛; 葛银林

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目的体外观察siRNA靶向干扰VEGF-C基因对4T1小鼠乳腺癌细胞的生物学行为影响.方法选用HifectinII真核转染试剂将化学修饰的针对小鼠VEGF-C基因的siRNA转染4T1小鼠乳腺癌细胞株,设立空白对照组(只加培养基),脂质体组(每孔加培养基与0.5 μL Hifectin II 真核转染试剂),SCR组(100 nM),siRNA组(100 nM).蛋白印迹试验检测转染前后细胞中VEGF-C的蛋白水平表达的变化;半定量RT-PCR检测VEGF-C、Survivin、BCL-2、BAX的mRNA水平表达的变化; MTT比色法检测细胞的增殖;Transwell小室方法检测肿瘤细胞的侵袭性改变;Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡.结果转染VEGF-C siRNA 48 h后4T1细胞的VEGF-C基因的mRNA和蛋白水平表达明显降低,空白对照组、脂质体组和siRNA SCR组各指标差异无显著性(P＞0.05);4T1细胞生长受到抑制,Transwell小室方法检测肿瘤细胞的侵袭性降低,Hoechst 33258荧光染色显示细胞内可见凋亡小体.结论化学修饰siRNA介导的RNA干扰能下调靶基因VEGF-C的表达并能够促进4T1细胞的凋亡,抑制4T1细胞的增殖与侵袭性.

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来源
《滨州医学院学报》 |2012年第2期|113-116|共4页
作者
于媛; 葛银林;
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作者单位

青岛大学医学院化学与分子生物学教研室,青岛,266021;

滨州医学院生物化学与分子生物学教研室;

青岛大学医学院化学与分子生物学教研室,青岛,266021;

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正文语种 chi
中图分类乳腺肿瘤;
关键词
siRNA; VEGF-C; Survivin; 乳腺癌; 凋亡;

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