维吉尼亚链霉菌P450-105D1在大肠杆菌中自诱导表达和雄烯二酮的羟化活性

张雁; 韩毛振; 罗学才; 王晶晶; 周明辉; 陈亚军

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雄烯二酮是甾体药物生产的重要中间体,其C9位羟基化产物9-羟基雄烯二酮也是多种重要甾体药物的合成前体,具有重要的临床药用价值.微生物转化生产9-羟基雄烯二酮具有重要的经济价值.将维吉尼亚链霉菌IBL14中svu005与pET28a质粒融合,导入大肠杆菌BL21(DE3).使用优化的自诱导培养基诱导表达其产物细胞色素P450-105D1(CYP105D1)蛋白,以雄烯二酮等多种甾体作为底物进行微生物羟化.结果显示,构建的重组质粒pET28a-svu005在大肠杆菌中成功表达,使用ZYM培养基,自诱导表达的活性蛋白产量(0.0916 nmol/L)显著高于传统的IPTG诱导方式的产量(0.0367 nmol/L).表达产物CYP105D1可以羟化雄烯二酮,经HPLC检测,产物为9-羟基雄烯二酮.发现了微生物转化合成9-羟基雄烯二酮的新途径,具有很好的工业应用前景.

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来源
《生物学杂志》 |2019年第5期|46-51|共6页
作者
张雁; 韩毛振; 罗学才; 王晶晶; 周明辉; 陈亚军;
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作者单位

合肥师范学院生命科学学院;

合肥231601;

华中科技大学生命科学与技术学院;

武汉430074;

合肥停弦渡科技有限公司;

合肥231601;

合肥师范学院生命科学学院;

合肥231601;

合肥师范学院生命科学学院;

合肥231601;

合肥师范学院生命科学学院;

合肥231601;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
9-羟基雄烯二酮; 微生物转化; 细胞色素P450-105D1; 自诱导表达;

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