利用CRISPR/Cas9系统构建人HIF-1α基因敲除细胞株

杨芳; 张宝云; 向伟; 王凭青; 向远彩

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利用CRISPR/Cas9系统构建人HIF-1α基因敲除细胞株

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在人源HIF-1α的PAS结构域内设计特异性靶点,构建Cas9-gRNA-HIF-1α敲除质粒,并将其转染至细胞后经嘌呤霉素筛选出21个单克隆细胞株,随后通过酶切、测序分析及下游基因验证等方法检测,最后得到一株特异性敲除HIF-1α的纯合子细胞(H20).所设计的靶点能够有效地编辑HIF-1α,将为在其他细胞中通过CRISPR/Cas9系统特异性敲除HIF-1α提供方法借鉴.与此同时,也将为后续揭示HIF-1在由正常排卵事件演变成卵巢肿瘤过程中的作用机制奠定基础.

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来源
《生物学杂志》 |2020年第6期|33-37|共5页
作者
杨芳; 张宝云; 向伟; 王凭青; 向远彩;
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作者单位

西南医科大学基础医学院泸州646000;

重庆大学生物工程学院重庆400000;

重庆大学生物工程学院重庆400000;

重庆大学生物工程学院重庆400000;

西南医科大学基础医学院泸州646000;

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正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
HIF-1α基因; CRISPR/Cas9; 基因敲除;

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