创伤弧菌溶细胞素融合蛋白重组、表达与细胞毒活性鉴定

桂静; 肖美英; 楼永良; 胡蝶; 严杰; 朱晔晶

首页> 中文期刊> 《中国细胞生物学学报》 >创伤弧菌溶细胞素融合蛋白重组、表达与细胞毒活性鉴定

创伤弧菌溶细胞素融合蛋白重组、表达与细胞毒活性鉴定

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

研究重组创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbili-cal vein endothelial cells,human ECV304)凋亡的作用。诱导含pET-28a(+)vvhA重组质粒的BL21大肠杆菌表达创伤弧菌溶细胞素融合蛋白,应用Ni2+亲和层析方法对rVvhA进行纯化;利用分步稀释加透析相结合的方法进行蛋白质复性;绵羊红细胞裂解试验对复性后的rVvhA进行溶血活性初步测定;MTT法检测rVvhA对人ECV304细胞的体外毒性作用;应用Hochest33342/PI活细胞荧光双染及流式细胞术分析rVvhA对人ECV304细胞诱导凋亡的影响。结果显示,用Ni2+-NTAHisBand亲和层析柱纯化rVvhA纯度达88.6%左右;复性后的rVvhA有一定的溶血活性,其溶血活性具有时间-剂量依赖性;MTT结果显示rVvhA具有降低人ECV304细胞的存活率活性;浓度为2.0HU/mlrVvhA作用人ECV30412h后,其诱导凋亡的活性高于对照组和浓度为0.5HU/mlrVvhA处理组,具有剂量依赖性;浓度为2.0HU/mlrVvhA处理组加用40μmol/Lcaspase全酶抑制剂(Z-VAD-FMK)后凋亡率较2.0HU/mlrVvhA处理组有一定程度降低。rVvhA对人ECV304细胞具有诱导凋亡的生物学活性,推测诱导调亡途径可能与caspase家族有关。

著录项

来源
《中国细胞生物学学报》 |2008年第1期|89-94|共6页
作者
桂静; 肖美英; 楼永良; 胡蝶; 严杰; 朱晔晶;
展开▼
作者单位

温州医学院微生态学研究所;

浙江省医学遗传学重点实验室;

浙江大学医学院病原生物学教研室;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;食品标准与检验;
关键词
创伤弧菌; 溶细胞素; rVvhA; 人ECV304细胞; 细胞凋亡; caspase;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 创伤弧菌溶细胞素vvhA融合蛋白细胞毒活性相关分子机制的探讨 [J] . 桂静 ,朱晔晶 ,楼永良 . 检验医学教育 . 2010,第002期
2. 创伤弧菌溶细胞素融合蛋白细胞毒活性相关分子机制研究 [J] . 桂静 ,胡蝶 ,郑丽 . 中华微生物学和免疫学杂志 . 2008,第005期
3. 创伤弧菌溶细胞素基因重组蛋白复性条件的优化及溶血活性鉴定 [J] . 李桂军 ,谢旦立 ,楼永良 . 温州医学院学报 . 2007,第004期
4. 创伤弧菌溶细胞素对小鼠脾脏和肺脏T细胞细胞毒活性的差异性影响 [J] . 王永明 ,高晖 ,郑蒙蒙 . 中华微生物学和免疫学杂志 . 2016,第011期
5. 创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对人Caco-2细胞IL-8基因表达和IL-8分泌的影响 [J] . 谢旦立 ,王波 ,丁卉 . 中华微生物学和免疫学杂志 . 2010,第001期
6. 重组鸡白细胞介素-6/2融合蛋白对鸡T、B淋巴细胞免疫活性的影响研究 [C] . 李勤楠 ,闫若潜 ,吴志明 . 河南省畜牧兽医学会暨饲料饲草学分会2015年度学术交流会 . 2015
7. 创伤弧菌溶细胞素融合蛋白细胞毒活性相关分子机制的实验研究 [A] . 桂静 . 2008

创伤弧菌溶细胞素融合蛋白重组、表达与细胞毒活性鉴定

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅