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山橿乙酸乙酯部位对LPS诱导RAW264.7细胞的影响

         

摘要

目的:以脂多糖(LPS)诱导RAW264.7作为炎症模型,探究山橿乙酸乙酯部位对LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制作用及机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测不同给药浓度的山橿乙酸乙酯部位对RAW264.7存活率的影响,确定给药浓度。用LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型,分别加入质量分数为30、15、7.5μg/mL山橿乙酸乙酯部位,观察山橿乙酸乙酯部位对LPS诱导RAW264.7细胞炎症的影响及其作用机制。Griess试剂法测定细胞上清液NO水平;ELISA法测定细胞上清液炎症因子IL-6、TNF-α水平;分光光度计法检测细胞上清液中MDA、SOD、LDH水平;DCFH-DA荧光探针法检测细胞中ROS水平;RT-PCR法测定细胞中iNOS、COX-2、IL-6、IL-1β mRNA的表达;Western blot法测定细胞中iNOS、COX-2蛋白表达。结果:山橿乙酸乙酯部位能显著降低LPS诱导下RAW264.7细胞炎症模型上清中NO、IL-6、TNF-α、MDA、LDH、ROS水平,降低iNOS、COX-2、IL-6,IL-1β mRNA及iNOS、COX-2蛋白表达。结论:山橿乙酸乙酯部位对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型具有较好抗炎效果,其内在的分子机制可能与抑制NF-κB信号通路相关蛋白有关。

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