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miR-7850在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞增殖和迁移的影响

         
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目的观察微小RNA（miR）-7850在肾癌组织中的表达,探讨miR-7850对肾癌细胞增殖和迁移的影响以及对丝氨酸蛋白酶抑制剂因子B3（SERPINB3）基因表达的调控作用。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肾癌组织和肾癌细胞系中miR-7850的表达。选择miR-7850表达最低的肾癌细胞系,采用Lipofectamine 2000转染试剂分别将阴性对照序列（miR-NC）和miR-7850模拟物转入肾癌细胞,定义为miR-NC组和miR-7850组。qRT-PCR检测转染后肾癌细胞内miR-7850的表达。采用CCK-8法和Transwell实验检测转染后细胞增殖和迁移能力。采用生物信息学技术预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-7850的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测转染后肾癌细胞内SERPINB3的表达。结果与癌旁组织（5.95±0.44）相比,miR-7850在肾癌组织（1.19±0.33）的表达较低（P＆0.01）。与永生化近端肾小管上皮细胞（1.01±0.07）相比,miR-7850在肾癌细胞系的表达较低（P＆0.05）,在A498细胞中（0.13±0.01）表达最低（P＆0.01）。miR-7850组细胞内miR-7850的表达（7.46±0.93）较miR-NC组（1.01±0.08）明显增加（P＆0.01）,表明转染成功。与miR-NC组相比,miR-7850组细胞增殖能力明显降低（P＆0.05）。miR-NC组和miR-7850组迁移细胞数量分别为（139.50±12.31）个和（75.09±16.05）个,miR-7850组细胞迁移能力明显下降（P＆0.01）。生物信息学技术显示miR-7850的靶基因是SERPINB3。双荧光素酶报告基因实验证实miR-7850可靶向结合SERPINB3基因（P＆0.05）。qRT-PCR和Western blot检测显示,与miR-NC组相比,miR-7850组细胞中SERPINB3的表达明显降低（P＆0.05）,CDK4、Cyclin D1、Snail、Vimentin蛋白表达均降低（P＆0.05）。结论 miR-7850在肾癌组织和细胞系中低表达,miR-7850可抑制肾癌A498细胞的增殖和迁移能力,可能与其抑制SERPINB3基因的表达有关。

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