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用MTT法检测羊胎盘免疫调节因子对T淋巴细胞增殖活力的影响

         

摘要

目的:建立MTT比色法;用MTT法观察羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对T淋巴细胞的调节功能.方法:以正交实验设计四个因素三个水平来筛选MTT实验最佳条件,用3批次GPIF重复实验来证明MTT法的重复性;以MTT比色法为检测手段,通过体外实验及动物实验来观察GPIF对T淋巴细胞增殖活力的影响.结果:MTT法的最佳实验条件为细胞浓度106个/孔、刀豆蛋白浓度5μg/ml、培养结束前4h加入MTT继续孵育,整个细胞培养过程为48h;GPIF可以促进正常T淋巴细胞的增值活力(P<0.01),显著恢复T淋巴细胞增殖活力的抑制(P<0.05).结论:MTT法可作为检测GPIF活性的稳定方法;GPIF可促进T淋巴细胞增殖活力,增强T淋巴细胞介导的细胞免疫功能.

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