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首页> 中文期刊> 《临床内科杂志》 >微小RNA-612抑制低氧诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转化作用及其分子机制

微小RNA-612抑制低氧诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转化作用及其分子机制

         
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目的 探讨微小RNA(miR)-612对低氧诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响及其分子机制.方法 分别以100μmol/L的氯化钴(CoCl2·6 H2 O,Co)处理体外培养的HK2人肾小管上皮细胞株6 h、12 h和24 h,检测低氧对细胞miR-612表达的影响.将HK2细胞分为对照组、单纯低氧组(100μmol/L Co处理24 h)、低氧+10 nmol/L miR-612转染组和低氧+30 nmol/L miR-612转染组,检测各组miR-612的表达,采用Western blot检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)和上皮钙黏素(E-cad)的表达.预测、验证miR-612的靶基因,并检测miR-612表达水平变化对靶基因蛋白及其下游蛋白表达的影响.结果 Co造成的低氧处理导致细胞中miR-612表达显著降低(P<0.05);Co处理24 h,miR-612表达水平下降约80％以上(P<0.05).10 nmol/L miR-612转染导致低氧诱导的 α-SMA表达水平下降约50％,E-cad的表达水平显著上升,30 nmol/L miR-612转染产生的上述效果更明显.miR-612可靶定WNT10A mRNA,并抑制WNT10A蛋白及β连环蛋白(β-catenin)的表达.结论 MiR-612抑制低氧诱导的肾小管上皮细胞转分化,该作用可能通过抑制WNT10A介导的WNT/β-catenin通路实现.

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