体外诱导人类诱导性多能干细胞分化为造血干/祖细胞的研究

张坤; 黄可; 李栋; 潘光锦; 汪运山

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体外诱导人类诱导性多能干细胞分化为造血干/祖细胞的研究

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本研究探讨体外诱导人诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)分化为造血干/祖细胞的能力.在体外用小鼠骨髓基质细胞OP9与人类iPSC共培养的方法,将iPSC诱导分化为造血干/祖细胞;用流式细胞术检测造血干/祖细胞表面标志物的表达水平;用实时定量PCR检测分化过程中iPSC及造血干/祖细胞的相关基因mRNA表达水平的变化;用免疫磁珠法分离CD34+造血干/祖细胞并进行半固体集落形成实验检测细胞的集落形成能力.结果表明,iPSC与OP9细胞共培养诱导造血分化的第4天即可观察到iPSC形态变化;流式细胞术检测显示,分化得到的细胞表达已知的造血干/祖细胞相关表面标志物CD34和CD43分子.在体外分化过程中多能性的标志基因Oct4的表达逐渐下降,造血相关转录因子Gata-2的表达逐渐升高,而Runx-1的表达量则呈波浪式变化,CD34表达量逐渐升高.集落培养14 d能够得到红系集落(CFU-E),粒系集落(CFU-G),巨核系集落(CFU-M),粒-巨核系集落(CFU-GM)和混合系集落(CFU-GEMM).结论:iPSC细胞能够在体外通过与OP9细胞共培养分化为造血干/祖细胞.

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来源
《中国实验血液学杂志》 |2014年第1期|136-141|共6页
作者
张坤; 黄可; 李栋; 潘光锦; 汪运山;
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作者单位

山东省医学科学院基础医学研究所,山东济南250062;

济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院,山东济南250062;

中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州560000;

山东大学齐鲁医院低温医学研究室,山东济南250012;

中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州560000;

山东省医学科学院基础医学研究所,山东济南250062;

济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院,山东济南250062;

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正文语种 chi
中图分类 R329.28;
关键词
诱导性多能干细胞; 骨髓基质细胞; 造血干细胞; 造血祖细胞; 诱导分化;

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