白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

何琳; 徐海圣; 王美珍; 戎华南

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根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因保守序列,利用Primer Explorerv4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的LAMP检测方法与巢式PCR进行了比较分析.结果表明,LAMP最适反应在64℃恒温条件60 min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果.LAMP方法的最低检出限为100拷贝/μL,灵敏度较巢式PCR高100倍,而且LAMP方法在1 h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果.用建立的LAMP方法对临床发病南美白对虾样品进行了检测,结果表明,LAMP方法适合对虾白斑综合征病毒的现场快速检测.

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来源
《水产学报》 |2010年第4期|598-603|共6页
作者
何琳; 徐海圣; 王美珍; 戎华南;
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作者单位

浙江大学动物科学学院,浙江,杭州,310029;

浙江大学动物科学学院,浙江,杭州,310029;

慈溪市水产技术推广中心,浙江,慈溪,315300;

慈溪市水产技术推广中心,浙江,慈溪,315300;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类各种虾的病虫害及其防治;
关键词
对虾; 白斑综合征病毒; 环介导等温扩增; 快速检测;

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