鳜下丘脑神经元细胞培养

旷玉兰; 梁旭方; 蔡文静; 何珊; 徐晶; 高俊杰; 魏君冉

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为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术,本研究通过分离鳜下丘脑组织,用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液,并用完全培养液进行培养,在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示,培养第3天时细胞贴壁量少,胞体小并且呈单个分布;在培养第4天,细胞的数量显著增多,且具有典型的神经元的形态,胞体饱满;第5天神经元胞体的融合度进一步增大,突起增长增粗,许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络;第6天细胞活性减弱,开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性,结果显示,在培养第5天,细胞活性最高;采用荧光定量PCR（RT-PCR）法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定,经RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin,经免疫荧光鉴定,下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明,通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞,为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。

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来源
《水产学报》 |2021年第2期|179-186|共8页
作者
旷玉兰; 梁旭方; 蔡文静; 何珊; 徐晶; 高俊杰; 魏君冉;
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作者单位

1. 华中农业大学水产学院华中农业大学鳜鱼研究中心 2. 农业农村部鳜鱼育种创新基地农业农村部淡水生物繁育重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类水产动物学;
关键词
鳜; 下丘脑; 神经元细胞; 体外培养; 免疫荧光;

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