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中国明对虾'黄海1号'血细胞和肌肉cDNA文库的构建

         

摘要

采用SMART(Switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术构建了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血细胞和肌肉组织全长cDNA文库.以中国明对虾"黄海1号"血细胞和肌肉组织为材料,Trizol法提取总RNA,磁珠法纯化mRNA后,用SMART cDNA合成试剂盒合成双链cDNA.双链cDNA经SfiI酶切和CHROMA SPINtM-400过柱分级分离后,与λTriplEx2载体两臂进行连接,随后进行λ噬菌体体外包装反应,构建血细胞和肌肉全长cDNA文库.肌肉组织原始文库滴度为0.77×106 pfu/mL,血细胞原始文库滴度为2.36×106 pfu/mL;扩增后,肌肉组织文库滴度为3.0×109 pfu/mL,血细胞文库滴度为5.6×109 pfu/mL,重组率均达到98%以上.从各文库随机取出10个清晰的噬菌斑进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,其插入片段长度为400~2000bp,证明2个文库均具有较高的质量.785]

著录项

  • 来源
    《中国水产科学》 |2009年第5期|781-785|共5页
  • 作者单位

    中国水产科学研究院,黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东,青岛,266071;

    中国水产科学研究院,黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东,青岛,266071;

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    中国水产科学研究院,黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东,青岛,266071;

    中国水产科学研究院,黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东,青岛,266071;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 水产生物学;
  • 关键词

    中国明对虾; 血细胞; 肌肉; cDNA文库;

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