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黄鳍棘鲷血清IgM的纯化及兔抗血清的制备

         

摘要

分别采用Sepharose-6B凝胶过滤层析、Phenyl Sepharose FF疏水作用层析和rProtein A Sepharose亲和层析技术纯化黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)血清IgM,并将这3种层析纯化方法进行了比较.纯化产物进行SDS-PAGE,电泳结果扫描后经Band Scan5.0软件分析显示,单独使用Sepharose-6B凝胶过滤层析或Phenyl Sepharose FF疏水作用层析得到的IgM纯度只有56%左右;二者联合使用纯度可以达到69%,而rProtein A Sepharose亲和层析一步就可以达到89%的纯度;纯化得到的黄鳍棘鲷血清IgM的重链和轻链分子量分别为73.6 kD和26.5 kD.本研究还以rProtein Asepharose亲和层析纯化的黄鳍棘鲷血清IgM为抗原,制备其兔抗血清,采用Western Blot和双向琼脂扩散检测抗血清免疫学活性,并用间接ELISA检测其效价达到1:25 600,为进一步开展黄鳍棘鲷免疫学方面的研究奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国水产科学》 |2008年第1期|129-135|共7页
  • 作者单位

    中国水产科学研究院,南海水产研究所,广东,广州,510300;

    华中农业大学,水产学院,湖北,武汉,430070;

    中国水产科学研究院,南海水产研究所,广东,广州,510300;

    中国水产科学研究院,南海水产研究所,广东,广州,510300;

    中国水产科学研究院,南海水产研究所,广东,广州,510300;

    华中农业大学,水产学院,湖北,武汉,430070;

    中国水产科学研究院,南海水产研究所,广东,广州,510300;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 鲈形目;
  • 关键词

    黄鳍棘鲷; 免疫球蛋白; 纯化; 兔抗血清; ELISA;

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