洋葱伯克霍尔德氏菌L68邻苯二酚2,3-双加氧酶基因克隆、表达和纯化

吕鹏; 刘大桅; 张长铠

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采用自行设计的引物,从洋葱伯克霍尔德氏菌L68中PCR扩增得到phnE(邻苯二酚2,3-双加氧酶)基因,亚克隆到高表达载体pET 32a上,转入表达菌株中.经双向测序,证实构建过程中未出现突变.重组子经IPTG诱导后,可以表达有活性的重组双加氧酶.选择26 ℃进行重组蛋白诱导.薄层扫描显示,表达重组蛋白总量最高可占总蛋白的64.92%.利用金属螯合层析对重组蛋白进行了一步纯化,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白纯度达到95%.

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来源
《食品与生物技术学报》 |2006年第3期|11-14|共4页
作者
吕鹏; 刘大桅; 张长铠;
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作者单位

山东大学;

微生物技术国家重点实验室;

山东;

济南;

250100;

山东大学;

微生物技术国家重点实验室;

山东;

济南;

250100;

山东大学;

微生物技术国家重点实验室;

山东;

济南;

250100;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
洋葱伯克霍尔德氏菌; 邻苯二酚2; 3-双加氧酶; 克隆表达;

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