建立SYBRGreen实时RT-PCR定量检测大鼠I型胶原mRNA水平方法

温冬青; 赵锦荣; 孔亚林; 郭慧芳; 阎小君

首页> 中文期刊> 《空军军医大学学报》 >建立SYBRGreen实时RT-PCR定量检测大鼠I型胶原mRNA水平方法

建立SYBRGreen实时RT-PCR定量检测大鼠I型胶原mRNA水平方法

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的：基于双链嵌合荧光染料SYBR Green Ⅰ，建立一种快速、灵敏的检测大鼠Ⅰ型胶原mRNA表达水平的实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法．方法：提取大鼠肝脏总RNA，RT-PCR扩增Ⅰ型胶原基因部分片段，将其克隆入pMD18-T载体用作参比品．基于SYBR GreenⅠ双链嵌合染料建立检测大鼠Ⅰ型胶原mRNA表达水平方法．其中对一系列连续稀释的参比品进行实时PCR分析，评价所建立方法的检测灵敏度；对PCR产物的熔解曲线进行分析评价其特异性．结果：重组质粒构建成功，经测序鉴定，目的片段已插入pMD18-T载体内．所建立的实时RT-PCR方法的最低检测限度为1个拷贝／反应，在每反应10^0～10^7拷贝范围内，CT值（C代表cycle，T代表threshold；CT值指荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数）与起始模板浓度具有良好的线性关系，相关系数为0．991．结论：所建立的基于SYBR GreenⅠ双链嵌合染料的大鼠Ⅰ型胶原PCR检测方法具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点，适用于进一步的各种组织的大量样本检测．

著录项

来源
《空军军医大学学报》 |2006年第1期|63-65|共3页
作者
温冬青; 赵锦荣; 孔亚林; 郭慧芳; 阎小君;
展开▼
作者单位

第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所;

第四军医大学西京医院肝胆外科;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
基因表达; 聚合酶链反应; Ⅰ型胶原; mRNA;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 建立SYBR Green实时RT-PCR定量方法检测铜绿假单胞菌MexAB-OprM mRNA水平 [J] . 吴春明 ,李洪涛 ,覃慧敏 . 中华医院感染学杂志 . 2007,第11期
2. SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR定量检测前列腺癌患者外周血DD3mRNA [J] . 张黎明 ,章祖招 ,张鑫圣 . 中国实验诊断学 . 2007,第010期
3. 一步法 SYBR Green 实时定量 RT-PCR检测坦布苏病毒方法的建立 [J] . 刘青涛 ,李银 ,赵冬敏 . 江苏农业学报 . 2015,第004期
4. 牛病毒性腹泻病毒SYBR Green Ⅰ实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用 [J] . 韩猛立 ,黄新 ,钟发刚 . 新疆农业科学 . 2014,第002期
5. 新型鸭呼肠孤病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 [J] . 袁远华 ,吴志新 ,王俊峰 . 中国预防兽医学报 . 2013,第009期
6. SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测禽肺炎病毒方法的建立 [C] . 谢志勤 ,谢芝勋 ,刘加波 . 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会 . 2014
7. 猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病病毒SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法及多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR方法的建立 [A] . 王小武 . 2008

建立SYBRGreen实时RT-PCR定量检测大鼠I型胶原mRNA水平方法

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅