汉滩病毒76-118株G2S0.7嵌合基因重组腺病毒的构建及表达产物鉴定

张芳琳; 刘勇; 于澜; 胡刚; 吴兴安; 史梦远; 白文涛; 王海涛; 徐志凯

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目的 :在本室前期工作的基础上构建汉滩病毒M基因G2片段与S基因 0 .7kb片段嵌合基因的重组腺病毒 .方法 :构建含有汉滩病毒G2S0 .7嵌合基因的转移载体pShuttle G2S0 .7,然后通过特异性的酶切将嵌合基因与腺病毒DNA相连 ,电转化E .coliJM1 0 9并用PCR方法进行筛选和鉴定 ,获得重组腺病毒Adeno G2S0 .7DNA ,转染HEK2 93细胞得到重组腺病毒 .进一步对重组腺病毒滴度和表达产物进行鉴定 .结果 :构建了含G2S0 .7嵌合基因重组腺病毒 ,滴度可达 1 0 1 3 ～ 1 0 1 5pfu/L ;该重组腺病毒感染HEK2 93细胞后 ,表达出可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G2的特异性单抗 (mAb)所识别的融合蛋白 .结论 :利用腺病毒表达系统 ,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G2生物学活性的融合蛋白G2S0 .7。

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来源
《空军军医大学学报》 |2004年第12期|1057-1060|共4页
作者
张芳琳; 刘勇; 于澜; 胡刚; 吴兴安; 史梦远; 白文涛; 王海涛; 徐志凯;
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作者单位

第四军医大学基础部微生物学教研室;

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正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
汉坦病毒; 基因表达; 腺病毒科; 重组; 遗传;

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