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猪圆环病毒Ⅱ型血清抗体ELISA检测方法的建立

         

摘要

为了检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体,本试验建立了快速、敏感的ELISA诊断方法.通过比较差速离心、蔗糖不连续梯度离心、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等4种方法纯化PCV2抗原的包被效果,来确定最佳的PCV2包被抗原纯化方法,在此基础上,通过全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA稀释倍数的确定、待测血清稀释倍数的确定、封闭液浓度的确定、封闭时间的确定、HRP-SPA反应时间的确定、临界值的确定、特异性测定、重复性测定、符合率比较等,进一步优化检测PCV2抗体的间接ELISA方法.结果表明:对猪的多种病毒阳性血清进行ELISA检测,只有PCV2阳性血清呈阳性;对6份血清进行4次重复试验,方差分析显示P>0.05,差异不显著;与PCV2-ELISA试剂盒(INGEZIM公司生产)的符合率比较,其总符合率达88.89%.可见,优化建立的检测PCV2抗体的间接ELISA方法特异性强、重复性高、稳定性好,可用于PCV2血清学诊断和血清学普查.

著录项

  • 来源
    《福建农林大学学报(自然科学版)》 |2010年第3期|279-285|共7页
  • 作者单位

    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

    福建;

    福州;

    350013;

    福建农林大学动物科学学院;

    福建;

    福州;

    350002;

    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

    福建;

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    350013;

    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

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    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

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    福建农林大学动物科学学院;

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    350002;

    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

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    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

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    350013;

    福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;

    福建;

    福州;

    350013;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S858.282;
  • 关键词

    猪圆环病毒Ⅱ型; ELISA方法; 抗体;

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