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玻璃化法超低温保存荔枝胚性愈伤组织及其植株再生

         

摘要

采用玻璃化法对荔枝胚性愈伤组织超低温保存及植株再生进行了初步探讨.将继代保存15 d的荔枝胚性愈伤组织转接到预培养基[MS+50 mL·L-1 二甲基亚砜(DMSO)+1 mg·L-1 2,4-D+20 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂糖]中,在5 ℃低温下预培养.将预培养后的愈伤组织于常温下用体积分数为60%玻璃化溶液(2PVS2)装载20 min,再于0 ℃下用PVS2溶液平衡40 min;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存.1周后取出,于40 ℃温水浴中化冻,弃PVS2,用1. 2 mol·L-1蔗糖液+MS基本培养基的洗涤液洗涤3次,再接种到新鲜的培养基中恢复培养,恢复培养后的胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.

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