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常绿阔叶林优势种福建青冈RAPD反应体系的建立

         

摘要

以福建青冈幼叶为材料,利用改进的CTAB法提取福建青冈幼叶的总DNA,探索适合于随机扩增多态DNA标记(RAPD)扩增的反应体系.结果表明,福建青冈合适的RAPD反应体系为:反应体积15 μL,含10 ng模板DNA、1.5 mmol·L-1 MgCl2、0.3 μmol·L-1引物、0.3 mmol·L-1 dNTP、1 U Taq DNA聚合酶.扩增程序为:94 ℃预变性3 min,然后于94 ℃变性30 s,37 ℃复性30 s,72 ℃延伸90 s,循环41次,最后于72 ℃延伸7 min.应用上述反应体系进行福建青冈的RAPD扩增反应,扩增产物进行12 g·L-1琼脂糖凝胶电泳,EB染色后用紫外凝胶成像系统分析,可获得满意的指纹图谱.

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