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首页> 中文期刊> 《甘肃农业大学学报》 >赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响

赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响

         
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摘要

The obj ective of this study was to use the primary bovine mammary epithelial cells as the model,understanding the regulatory effects of single supplement with different concentrations of lysine on cells proliferation by MTT and milk protein synthesis molecular mechanism by qRT-PCR.Treatment groups based on the Earle's balanced salts were added with lysine of different concentrations.The primary bovine mammary epithelial cell proliferation in 12 h and 24 h and the gene on milk protein synthesis were detected.The results showed that adding 0.5~24 mmol/L lysine for 12 h improved the proliferation of pri-mary bovine mammary epithelial cell (P=0.05);adding 0.5~8 mmol/L lysine for 24 h,the rate of primary bovine mammary epithelial cell proliferation significantly increased (P0.05).Expression of gene eIF4E decreased,but not significant (P>0.05 ).These results demonstrated that lysine supplements could significantly promote the synthesis of casein,which the process might be a potential control point in the regulation of milk protein synthesis in the primary mammary epithelial cell.%为了在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及 mTOR 信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响.试验用厄尔平衡溶液(EBSS)代替正常培养基来处理原代奶牛乳腺上皮细胞,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采用 MTT法检测细胞12 h和24 h的增殖和利用 qRT-PCR技术检测4个编码酪蛋白基因和8个mTOR信号通路中与乳蛋白合成翻译相关基因的相对表达量.结果表明：添加赖氨酸12 h,浓度为0.5~24 mmol/L时,原代奶牛乳腺上皮细胞增殖数量增加(P=0.05)；添加赖氨酸24 h,浓度为0.5~8 mmol/L时,细胞增殖数量增加(P <0.01).当赖氨酸的添加浓度为0.5~16 mmol/L 时,CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因表达均显著上调(P<0.01).当赖氨酸添加量为0.5~16 mmol/L时,mTOR和raptor 基因的表达量显著上调(P<0.05).在添加不同浓度的赖氨酸时,下游通路信号因子S6K1、4EBP1和eEF2基因表达均显著上调(P<0.01)；rps6基因表达上调,eIF4E 基因表达下调,但差异均不显著.以上结果表明,补充赖氨酸能显著促进乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成,这一过程与mTOR信号通路介导蛋白质合成相关.

著录项

  • 来源
    《甘肃农业大学学报》 |2015年第3期|7-15|共9页
  • 作者

    高海娜; 韩荣伟; 郑楠; 胡菡; 李发弟; 王加启;

  • 作者单位

    甘肃农业大学动物科学技术学院;

    甘肃 兰州 730070;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    农业部奶产品质量安全风险评估实验室 北京;

    北京 100193;

    农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心 北京;

    北京 100193;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    动物营养学国家重点实验室;

    北京 100193;

    青岛农业大学食品科学与工程学院;

    山东 青岛 266109;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    农业部奶产品质量安全风险评估实验室 北京;

    北京 100193;

    农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心 北京;

    北京 100193;

    甘肃农业大学动物科学技术学院;

    甘肃 兰州 730070;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    农业部奶产品质量安全风险评估实验室 北京;

    北京 100193;

    农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心 北京;

    北京 100193;

    甘肃农业大学动物科学技术学院;

    甘肃 兰州 730070;

    甘肃农业大学动物科学技术学院;

    甘肃 兰州 730070;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    农业部奶产品质量安全风险评估实验室 北京;

    北京 100193;

    农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心 北京;

    北京 100193;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;

    动物营养学国家重点实验室;

    北京 100193;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 乳用;
  • 关键词

    赖氨酸; 酪蛋白; mTOR; 细胞增殖; 基因表达;

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