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基于自噬探讨龙蛭汤含药血清对H2O2诱导SH-SY5Y神经细胞氧化损伤的保护作用

         

摘要

目的:基于自噬探讨龙蛭汤(LZD)含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导的神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化损伤的保护作用.方法:采用H2O2诱导SH-SY5Y构建氧化应激损伤模型,观察LZD含药血清对细胞的保护作用.加入自噬激动剂雷帕霉素(RAP)、抑制剂氯喹(CQ)干预SH-SY5Y细胞,观察自噬在SH-SY5Y损伤中的作用,实验分为8组:正常对照组、空白血清(BS)组、模型组、LZD组、RAP组、RAP+LZD组、CQ组、CQ+LZD组.CCK-8法检测各组细胞活力,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测自噬相关基因Beclin1、LC3 mRNA相对表达量,Western blotting法比较细胞Beclin1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果:与模型组比较,LZD组细胞存活率显著提高,LZD组Beclin1、LC3 mRNA表达增强,Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(均P<0.05).LZD含药血清协同RAP、CQ干预SH-SY5Y细胞,与CQ组比较,CQ+LZD组Beclin1、LC3 mRNA相对表达量和细胞活力显著升高(均P<0.05);与RAP组比较,RAP+LZD组Beclin1、LC3 mRNA相对表达量降低,细胞活力升高(均P<0.05).结论:LZD含药血清能够提高神经母细胞瘤细胞活力,并且可能通过调控自噬发挥神经元保护功能.

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