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适于膜片钳实验的心肌细胞分离方法及维拉帕米对钙电流的作用

         

摘要

目的:建立适应于膜片钳实验的大鼠单个心室肌细胞的分离方法,探讨L-型钙通道在大鼠心肌电活动中的作用.方法:采用改进Langendorff装置,酶解法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L-型钙电流及维拉帕米的作用.结果:该法分离到的心肌细胞存活率达80%~90%,高倍镜下细胞呈杆状,边缘清楚,表面光滑,纹理清晰;成功记录到典型L-型钙电流(Ica-L),给予维拉帕米(0.3、3、30 μmol/L)后呈浓度依赖性抑制钙电流,其抑制率分别为(44.35±5.52)%,(61.06±2.99)%,(71.88±4.45)%.结论:改进心肌细胞的分离方法可获得大量耐钙心室肌细胞,这些细胞具有正常的电生理特性.

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