松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

张学卫; 吴丽欣; 高宝嘉

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松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

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为了应用线粒体DNA研究松毛虫种群的遗传结构,本研究采用正交试验设计法L16(45)对影响松毛虫mtDNA PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验并对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了单因素梯度比较优化.建立了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳体系即在50 μL体系中含模板150 ng、0.10 μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚合酶、2.5 mmol/L Mg2+.同时通过PCR比较,确定最佳循环次数为35个循环,最佳退火温度为56 ℃,获得了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳扩增程序.

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来源
《河北农业大学学报》 |2010年第4期|77-80|共4页
作者
张学卫; 吴丽欣; 高宝嘉;
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作者单位

河北农业大学,林学院,河北,保定,071000;

河北农业大学,林学院,河北,保定,071000;

河北农业大学,林学院,河北,保定,071000;

河北北方学院,河北,张家口,075000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类松毛虫;
关键词
松毛虫; PCR反应体系; 正交设计; 优化;

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