杂合抗菌肽Cec Md-Che Rc的分子设计及其克隆载体的构建

孙艳发; 张爱忠; 姜宁

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为了获得具有高抗菌活性和低溶血活性的抗菌肽,利用家蝇抗菌肽Cee Md和中国林蛙抗菌肽Chensirin,设计出杂合抗菌肽Cee Md-Che Rc,并构其克隆载体.选取Cec Md的N端和Chensirin的c端氨基酸序列组成杂合肽,通过互联网和计算机软件,分析比较杂合肽的特征参数并进行结构预测.采用重复序列PCR方法合成2条杂合肽Cee Md-Che Re I和Cee MdChe Rc IV的基因,并连接到克隆载体pMD18-T上.分析发现杂合抗菌肽中Cec Md-Che Rc I疏水性最强,Cec Md-Che Re IV净正电荷数最高;两者N端为疏水性a螺旋结构,c端为亲水性a螺旋结构;两者疏水性氨摹酸大体分布在螺旋轮的一侧,其余氨基酸分布在另一侧;带正电荷的氨基酸主要分布在亲水面上.2条杂合肽的基因大小分别为133 bp和124 bp;PCR、双酶切和测序鉴定表明成功地构建了克隆载体pMD18-T/Cec Md-Che Rc I和pMD18-T/Cec Md-Che Rc IV,为后续研究奠定了基础.

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来源
《黑龙江八一农垦大学学报》 |2009年第6期|47-5067|共5页
作者
孙艳发; 张爱忠; 姜宁;
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作者单位

黑龙江八一农垦大学动物科技学院;

大庆市163319;

黑龙江八一农垦大学动物科技学院;

大庆市163319;

黑龙江八一农垦大学动物科技学院;

大庆市163319;

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正文语种 chi
中图分类转化及克隆;
关键词
抗菌肽; 分子设计; 克隆载体;

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