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常备试剂法提取人外周血DNA

         

摘要

目的探讨使用一种常备试剂提取外周血DNA,而无需PK、毒性有机溶剂或特殊缓冲液。方法分别使用常备试剂法、试剂型kit法和柱式型kit法提取外周血DNA,进而比较3种方法的DNA产量和质量。结果使用常备试剂法,提取200μL人外周血的DNA量为(5.77±3.49)μg,低于试剂型kit法(P〈0.05),但与柱式型kit法(P=0.10)差异无统计学意义。常备试剂法提取的DNA样品,A230/A260为0.49±0.05,A260/A280为1.98±0.10,片段大于15 kb,Alu I、Bam HI-HF酶切完全,PCR扩增稳定、高效,DNA质量与两种kit法差异无统计学意义。常备试剂法的每样品耗费低,操作时间约30-40 min。结论常备试剂法能够保证外周血DNA产量和质量,试剂方便易得,操作快速、安全,且费用低廉,可作为一般实验室备选方案。

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