针对Cox-2基因siRNA载体构建和沉默效应

赵国新; 徐慧丹; 赵新合; 冯龙; 卫艳萍; 胡军

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针对Cox-2基因siRNA载体构建和沉默效应

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目的构建针对人Cox-2基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察RNA干扰对肺癌细胞Cox-2基因表达的沉默作用。方法设计Cox-2靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSINsi-hU6载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人肺癌细胞NCI-H446,采用RT-PCR检测Cox-2基因mRNA表达的变化。结果把针对Cox-2基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆入pSINsi-hU6载体,经过酶切鉴定与测序,结果正确;RT-PCR检测显示,Cox-2基因的表达水平明显降低。结论成功构建出显著沉默细胞Cox-2基因表达的siRNA载体。

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来源
《食管疾病》 |2007年第1期|1-4|共4页
作者
赵国新; 徐慧丹; 赵新合; 冯龙; 卫艳萍; 胡军;
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作者单位

河南省医学科学研究所免疫室;

淮阳卫生学校;

郑州市武警支队卫生队;

郑州大学基础医学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
RNA干扰; Cox-2; RT-PCR;

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