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抑制JWA基因表达对细胞因子TGF-β1诱导的心肌细胞凋亡的机制研究

         

摘要

目的:研究抑制JWA基因的表达对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌细胞凋亡的影响及作用机制.方法:用TGF-β1转染JWA RNA处理体外培养大鼠心肌H9 c2心肌细胞,采用反转录聚合酶链技术(RT-PCR)和Western blot法检测心肌细胞中JWA的表达水平的变化,采用噻唑蓝(MTT)检测心肌细胞增殖情况,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,对比检测心肌细胞中凋亡相关蛋白剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白、Bcl-2相关X(Bax)蛋白和Bcl-2蛋白水平,检测心肌细胞中产生的活性氧(ROS)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)的含量.结果:TGF-β1处理后的心肌细胞中JWA mRNA水平和Bcl-2蛋白水平、CAT、GSH-PX含量均明显高于正常培养的心肌细胞,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3、Bax蛋白水平、Bax/Bcl-2值、细胞中ROS、MDA含量均降低(P<0.05),与正常培养的心肌细胞相比,差异有统计学意义.结论:抑制JWA的表达可减少TGF-β1诱导的心肌细胞凋亡,促进心肌细胞增殖,减弱TGF-β1诱导的心肌细胞氧化损伤,其作用机制可能是通过减轻细胞的氧化损伤减少细胞凋亡.

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