利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒

胡勤学; 林木兰; 张春立; 吴德喜; 陈捷

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利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒

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参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别能从感病香橼和柑桔总核酸中扩增出210bp和370bp左右的特异DNA,分别相当于CEVd的左半部和全长片段,T1/T2未能扩增出产物;健康香橼和柑桔总核酸中均未能扩增出产物。扩增结果用DIG标记的CEVd-cDNA探针进行了确证。扩增结果说明:CEVd中国分离物在左端T区与CEVd-A株存在差异。PAGE-银染法分析扩增产物表明:建立的RT-PCR方法可从约0.1ng柑桔总核酸中扩增出全长CEVd-cDNA。

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来源
《植物学报：英文版》 |1997年第7期|613-617|共5页
作者
胡勤学; 林木兰; 张春立; 吴德喜; 陈捷;
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作者单位

中国科学院武汉病毒研究所;

湖南省园艺研究所;

武汉同济医科大学协和医院血液研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病害;
关键词
柑桔裂皮病; 类病毒; 反转录; 聚合酶链反应;

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