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脐带间质干细胞来源的外泌体抑制TGF-β_1诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化

         

摘要

目的:探讨脐带间质干细胞来源的外泌体(exosome from human umbilical mesenchymal stem cells,huc MSCex)对转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其机制。方法:体外培养大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞,TGF-β_1诱导使其发生EMT作为诱导组,未经任何处理的NRK-52E细胞为对照组,TGF-β_1处理24 h后加入huc MSC-ex共培养48 h为干预组。倒置显微镜下观察各组细胞形态;蛋白质印迹法检测细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原α1链(Col1A1)和TGF-β_1等蛋白表达,qRT-PCR检测miR-199a表达。结果:TGF-β_1诱导24 h后,细胞由卵圆形变为长梭形,且细胞密度降低。给予huc MSC-ex干预后,细胞形态恢复。与对照组相比,诱导组E-钙黏蛋白表达降低,N-钙黏蛋白,α-SMA、Col1A1和TGF-β_1表达升高;干预组相关蛋白表达较诱导组发生逆转;诱导组中miR-199a表达下调,而huc MSC-ex干预组表达增加。结论:huc MSC-ex通过上调NRK-52E细胞miR199a表达逆转由TGF-β_1诱导的EMT作用。

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