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CG5033基因在果蝇睾丸中调控生殖干细胞的自我更新和分化

         

摘要

目的:探讨CG5033基因在果蝇睾丸中对生殖干细胞自我更新和分化过程的影响。方法:采用UAS/Gal4系统驱动果蝇睾丸生殖干细胞(nos-Gal4)、分化的精原细胞(bam-Gal4)和包囊细胞(tj-Gal4)中UAS-CG5033 RNAi的表达。在F1代果蝇中挑选单只nos>CG5033 RNAi、bam>CG5033 RNAi及tj>CG5033 RNAi基因型成年雄蝇,与3只野生型处女蝇杂交,观察是否可获得后代果蝇;通过光学显微镜和免疫荧光染色方法观察野生型和CG5033 RNAi雄性果蝇睾丸中Vasa、眼缺陷蛋白(eyes absent,Eya)、DE-cad、锌指结构域1蛋白(Zn finger homeodomain 1,Zfh1)和1B1的表达模式。结果:与野生型果蝇组比较,nos>CG5033 RNAi组和tj>CG5033 RNAi组果蝇呈雄性不育,而bam>CG5033 RNAi果蝇组生育率未受影响。光学显微镜下,与野生型果蝇组比较,用nos-Gal4驱动UAS-CG5033 RNAi雄性果蝇的睾丸明显变小。免疫荧光染色结果表明,与野生型果蝇组比较,用nos-Gal4驱动UAS-CG5033 RNAi的雄性果蝇睾丸中的生殖细胞消失,包囊细胞代偿性增多,而用tj-Gal4驱动UAS-CG5033 RNAi的果蝇睾丸中出现生殖细胞肿瘤;bam>CG5033 RNAi睾丸未见明显异常。结论:CG5033基因编码的蛋白在果蝇睾丸生殖干细胞中影响细胞的自我更新能力,并可通过体细胞干细胞影响生殖干细胞的分化过程,最终导致生殖细胞肿瘤的形成。

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