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植酸酶在酿酒酵母细胞表面上的展示及其活性测定

         

摘要

提取黑曲霉总RNA反转录得到cDNA第一链,并以之为模板进行RT-PCR扩增出约1.4kb的植酸酶基因,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌DH5α,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后每隔12 h测定植酸酶酶活,结果测得最佳诱导时间为48 h.通过对表达产物的酶学性质研究,发现该表达产物在pH 7.0时具有较高植酸酶活性,同时该表达产物的最适温度约为65℃.

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